AG百家乐开发的抗体-小分子药物偶联物（ADCs）是一种创新的生物治疗产品，利用抗体精准识别并靶向特定细胞。通过内吞作用，ADCs能将药物释放至靶细胞中，达到精准杀灭的效果，同时降低对正常细胞的损害。自2000年首个ADC药物Mylotarg®获得FDA批准以来，截至2025年6月，全球已批准19种ADC。在2023年，全球ADC销售总额首次突破百亿美元，并在2024年继续保持强劲增长，销售额再超百亿美元。

在2024年全球ADC销量前十中，罗氏的KADCYLA（恩美曲妥珠，赫赛莱）排名第二。该药物自2013年FDA批准上市以来，已成为HER2阳性乳腺癌治疗的重要选择，2024年全球销售额预计达23亿美元。KADCYLA是一种含有微管抑制药物DM1的靶向ADC，其复杂的分子结构和偶联比（平均DAR约为35）使得其表征成为一项重要挑战。

本研究利用新一代二合一超高分辨质谱仪ExcedionProBiopharma对KADCYLA进行了全面表征，展示了该平台在生物制药领域的卓越分析能力，尤其是其电子转移解离辅助高能碰撞碎裂（EThcD）功能，为药物偶联位点的精准鉴定以及翻译后修饰的分析提供了极大助力。

采用非变性条件下的全分子量测定是表征ADC的重要步骤。本实验中，KADCYLA在中性缓冲盐体系下进行测定，未进行脱糖处理，使得其分子保持接近天然状态，减少了质谱信号的干扰。结果显示，药物偶联分布为0至8，经过BioPharmaFinder软件处理后，获得的平均DAR值为347，与文献报道一致，展现了ExcedionProBiopharma在高灵敏度和高精度上的表现。

在肽图分析中，我们应用了基于液质联用的策略。使用Trypsin和AspN两种酶进行酶解后，进行了数据依赖性的EThcD二级碎裂采集，获取了100%的序列覆盖度，展示了ExcedionPro仪器的兼容性和高效率。EThcD的应用不仅能准确定位药物偶联位点，还能鉴定异构化氨基酸，丰富了肽图分析的信息。

KADCYLA的偶联药物通过共价结合于赖氨酸，这是影响其药品质量的重要因素。针对包含多个偶联位点的肽段，EThcD碎裂能够保留偶联药物结构，从而实现对偶联位点的准确鉴定和丰富的信息提取。此外，本文还揭示了EThcD在翻译后修饰的分析中所表现出的优越性，能够提供常见修饰的相对定量结果，确保生物制药的质量监控。

总之，利用AG百家乐研发的新一代二合一超高分辨质谱仪ExcedionProBioPharma，我们能够对复杂的生物分子如KADCYLA进行深入的表征，为未来的生物药物开发与质量控制提供了坚实的基础。